Microscopio óptico de campo brillante o campo luminoso
De entre los tipos de microscopios ópticos existentes, éste es el más común y el más utilizado. Su funcionamiento está explicado en la entrada sobre el microscopio óptico, ya que es la base de desarrollo del resto de tipos de microscopios existentes.
En esta práctica y en esta otra podemos ver ejemplos de la utilización de este tipo de microscopio, así como los resultados de su uso con determinadas preparaciones.
Microscopio de campo oscuro
Este microscopio es, en esencia, un microscopio de campo brillante, con una modificación sensible en su diafragma. En lugar de un diafragma de tipo iris, se instala un diafragma de campo oscuro en el microscopio. Este dispositivo impide que los rayos de luz que salen del condensador incidan directamente en la preparación, permitiendo que solo incidan en ella rayos de luz que llegan a la preparación de manera oblicua.
El diafragma de campo oscuro no es más que un disco opaco que obtura el cilindro de luz del condensador. Gracias a él, al objetivo solo llegan los haces de luz que son dispersados por los objetos de la preparación. De este modo, dichos objetos aparecen brillantes sobre un fondo oscuro.
Esta microscopía ha sido esencial en la observación del Treponema Pallidum, agente causal de la sífilis. A través de un microscopio de campo oscuro se pueden observar células y microorganismos vivos que no son observables con el microscopio de campo brillante debido a la falta de contraste.
Microscopio de contraste de fase
Frits Zernike ideó el microscopio de contraste de fase en el año 1949. Este microscopio permite ver objetos transparentes, o incoloros, que no presentan contraste con la luz. Se utiliza para visualizar células vivas y revelar detalles de su estructura interna. En hematología se utiliza para algunos recuentos de plaquetas, en microbiología para el estudio de las estructuras internas de los microorganismos y en bioquímica para el estudio del sedimento urinario.
El microscopio de contraste de fase es, en esencia, un microscopio de campo brillante con dos añadidos:
- Diafragma anular: A diferencia del tipo iris, este diafragma solo deja pasar la luz a través de una línea circular. Al atravesarlo, la luz forma un cilindro hueco que ilumina la preparación.
- Placa anular de fase: Es una lente que se añade al sistema de lentes del objetivo. Esta placa enlentece los rayos de luz procedentes del condensador, y es indispensable que se encuentre alineada con el diafragma.
El fundamento del funcionamiento de este microscopio es el siguiente: La luz es una onda sinusoidal caracterizada por su amplitud y su longitud de onda. El brillo, o intensidad, depende de la amplitud de onda, y el color viene determinado por la longitud de onda.
Si la luz atraviesa un objeto absorbente, la radiación transmitida se reduce en intensidad. Sin embargo, si atraviesa un medio transparente la intensidad es la misma, pero se provoca una perturbación que ocasiona un retardo en la onda. Este retardo origina una diferencia de fase que el ojo no es capaz de detectar, y tampoco la placa fotográfica. El microscopio de contraste de fase convierte esta diferencia de fase en diferencias de intensidad, que sí son perceptibles para nuestro ojo.
Microscopio de luz polarizada
Este microscopio se sirve de la luz polarizada para obtener imágenes a color, dependiendo del grado de giro que sufra el rayo de luz al incidir sobre cada uno de los puntos de la muestra. Su uso está extendido en mineralogía, y en el laboratorio clínico y biomédico se utiliza para determinar cristales en diferentes líquidos biológicos.
Se diferencia de un microscopio de campo brillante en el uso de dos lentes de polarización. Una de estas lentes, el polarizador, se sitúa entre la fuente luminosa y la muestra. La otra lente, el analizador, se situa entre la muestra y los oculares. La función de estas lentes es dejar pasar solo los rayos de luz que vibren en un determinado plano. Dichas lentes son prismas de Nicol o polaroides artificiales.
De la luz que llega al polarizador, solo pasa aquella que vibra en el plano de polarización previsto. El analizador cuenta con un plano de polarización perpendicular al del polarizador, ésto permite que el rayo de luz que atraviesa el polarizador, al llegar al analizador, se extinga al no coincidir con el plano de polarización. Esto da como resultado la visualización de un campo oscuro.
Comentarios
Publicar un comentario